蛋白质组学中的双相电泳技术

被引:21
作者
夏书华
机构
[1] 中国医学科学院协和医科大学肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室北京
关键词
蛋白质组; 组织样品制备; 2-DE; 蛋白溶解性; 染色;
D O I
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中图分类号
Q503 [生物化学技术];
学科分类号
070307 [化学生物学];
摘要
本文主要阐述了在蛋白质组研究中双相电泳 (2 - dim ansional electrophoresis,2 - DE)的应用方法。在制备组织的蛋白样品时 ,细胞刮落法和激光捕捉显微切割 (laser capture microdissection,L CM)法较为理想。细胞裂解液除了标准的裂解方法外 ,新型变性剂如硫尿、TBP、ASB14 / C8Φ 等的加入可显著增强蛋白在 2 - DE中的溶解性。固定胶条 (imm obilized p Hgradients,JPG)的使用 ,不仅提高了胞内蛋白的分离效率 ,而且增加了双相电泳的可重复性。在蛋白染色技术方面 ,出现了一种新型染色材料 SYPRO RU BBY,它不但具有较高的灵敏度 ,而且使分析和制备合二为一 ,简化了 2 - DE的过程
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[1]
..Patton W F;.Electrophoresis.2000, 21