用定量RT-PCR方法检测脑梗死半影区内凋亡相关基因的表达

目的建立脑梗死后脑组织凋亡相关基因表达定量检测的精确、可靠的方法。方法采用SYBR Green荧光定量RT-PCR法,结合免疫组织化学,测定自发性高血压大鼠脑梗死后不同时相点几种凋亡相关基因的表达水平,包括:caspase3/CPP32、rIAP、caspase2等,同时比较其与半影区凋亡细胞数的相关性。结果在脑梗死半影区,凋亡细胞数量自3h开始逐渐升高,24h达到高峰,然后保持较高水平。而caspase3/CPP32自8h才升高,12h达到高峰,3d时便迅速回落到正常水平,而rIAP,在8h升高一倍,然后迅速降至正常,caspase2表达水平在脑梗死后与假手术组比较无明显改变。结论caspase3/CPP32是影响神经元凋亡的重要因素,但非唯一的和必不可少的,在脑缺血后,caspase3/CPP32等的激活或许与神经元凋亡的加重有关。