大豆花瓣蛋白双向电泳分析技术体系的优化

被引：8

作者：

郑天慧

宋波

姜自芹

刁桂珠

曾蕊

吴帅

拓云

刘珊珊

机构：

[1] 东北农业大学

来源：

哈尔滨师范大学自然科学学报 | 2010年 / 26卷 / 06期

关键词：

大豆花瓣; 双向电泳; 技术体系; 优化;

D O I：

暂无

中图分类号：

S565.1 [大豆];

学科分类号：

0901 ;

摘要：

双向电泳技术体系的优化是蛋白质组学研究的前提和基础.本文针对大豆花瓣含有大量色素和酚等干扰物质的现象,比较6种蛋白提取方法和2种蛋白裂解液配方,优化胶条范围和等电聚焦程序.结果表明:pH为4～7 IPG胶条适于大豆全花蛋白分离;TCA/丙酮+2D Clean Up试剂盒法去除杂质充分,提取的蛋白含量高、纯度好、分离效果佳、耗时短;蛋白裂解液采用5 mol/L尿素,2 M硫脲,2%CHAPS,2%SB3-10,5 mmol/L TCEP,20 mmol/L DTT,0.5%IPG Buffer为好;增加离心转速、时间和丙酮清洗次数能促进蛋白溶解,增加蛋白纯度,初步建立了一套适合大豆全花蛋白双向电泳分析的技术体系.

引用

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页数：6

共 14 条

[1]

豆科模式植物百脉根中TCP domain基因的生物学功能与花瓣发育的研究.[D].赵忠.复旦大学.2003, 02

[2]

豆科中TCP domain基因功能的研究以及百脉根kw突变体的遗传分析.[D].田朝霞.中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）.2002, 11

[3] 双向电泳比较两种方法获得的水稻叶片蛋白 [J].