携反义二型基质金属蛋白酶基因的重组腺病毒的构建

被引:5
作者
张明满
李德华
苟兴华
严律南
韩蕾
赵兰英
胡海洋
机构
[1] 四川大学华西医院普外科,成都地奥制约集团有限公司新药部,成都地奥制约集团有限公司新药部,四川大学华西医院普外科,成都地奥制约集团有限公司新药部,成都地奥制约集团有限公司新药部,成都地奥制约集团有限公司新药部成都,成都,成都,成都,成都,成都,成都
关键词
肝细胞肝癌; 二型基质金属蛋白酶; 重组腺病毒; 反义RNA技术; 基因治疗;
D O I
暂无
中图分类号
R735.7 [肝肿瘤];
学科分类号
100112 [医学生物化学与分子生物学];
摘要
目的 构建携带反义二型基质金属蛋白酶 (MMP2 )基因的重组腺病毒。方法 从新鲜肝癌组织中提取总RNA ,用RT PCR法合成MMP2cDNA序列中 5′端转录起始位点附近长约 5 0 0bp的基因片段 ,将此片段反义克隆到腺病毒载体 (AdEasy)系统的多克隆位点 ,经转染 2 93细胞生成携带反义MMP2基因的重组腺病毒Ad MMP2 AS。结果 成功构建并包装携带反义MMP2基因片段的重组腺病毒Ad MMP2 AS,病毒滴度达 1× 10 8/ml。结论 构建的重组腺病毒Ad MMP2 AS可望能有效地将反义MMP2基因片段导入人肝癌细胞株 ,为进一步研究肝癌浸润和转移机理以及探讨抑制肝癌浸润和转移的方法提供实验基础。
引用
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共 1 条
[1]
原发性肝癌组织中明胶酶A基因表达增强 [J].
王爱民 ;
江龙安 ;
梁保忠 ;
李卫杰 .
中华普通外科杂志, 2000, (10)