大鼠γ-干扰素基因转染大鼠肺泡巨噬细胞和气道上皮细胞的实验研究

被引：1

作者：

黄桂君

农江

马壮

钱桂生

李淑萍

陈维中

机构：

[1] 第三军医大学附属新桥医院全军呼吸内科研究所,解放军第医院病理科,第三军医大学附属新桥医院全军呼吸内科研究所,第三军医大学附属新桥医院全军呼吸内科研究所,第三军医大学附属新桥医院全军呼吸内科研究所,第三军医大学附属新桥医院全军呼吸内科研究所重庆,南宁

来源：

第三军医大学学报 | 2002年 / 01期

关键词：

γ干扰素; 基因转染; 肺泡巨噬细胞; 气道上皮细胞;

D O I：

暂无

中图分类号：

R346 [];

学科分类号：

摘要：

目的　构建重组大鼠γ 干扰素真核表达载体 ,探讨其转染大鼠肺泡巨噬细胞 (AM)和气道上皮细胞的可行性及表达水平。方法　采用RT PCR技术克隆了大鼠γ 干扰素 ,并将其定向克隆到逆转录病毒载体pLXSN上 ,构成真核表达重组载体。将重组载体转染培养的AM和气道上皮细胞。用PCR法鉴定重组载体整合在细胞基因组DNA中。并检测细胞培养上清中γ 干扰素浓度和活性。结果　DNA测序证明 ,构建的重组载体中γ 干扰素的基因方向正确 ,DNA序列与GeneBank中大鼠的γ 干扰素cDNA序列相同。转染后AM和气道上皮细胞基因组DNA的PCR产物电泳可见转染的重组载体DNA片段条带。pLXSN IFN载体组的AM和气道上皮细胞培养上清中大鼠γ 干扰素浓度和活性显著高于pLXSN空载体组 (P <0 .0 1)。结论　本研究构建的大鼠γ 干扰素重组表达载体可成功地转染大鼠AM和气道上皮细胞 ,整合入基因组DNA ,并分泌有活性的γ 干扰素 ,为进一步的体内基因转染研究奠定基础

引用

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共 6 条

[1]

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[2]

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[3]

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[4]

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