巴戟天多糖通过p38 MAPK信号通路促间充质干细胞成骨分化的体外研究

目的:探讨巴戟天多糖对间充质干细胞(BMSCs)促成骨作用的影响及该作用与p38MAPK信号通路的相关性。方法:体外骨髓贴壁法培养BMSCs,取第3代细胞,流式细胞仪鉴定细胞表面抗原。实验分为3组:1)对照组(经典成骨诱导),用地塞米松,β-甘油磷酸钠,VitC和无药血清的DMEM/F12培养基体外培养第3代的BMSCs;2)巴戟天多糖(MOP)组,用含巴戟天多糖药物血清的DMEM/F12培养基体外培养第3代的BMSCs;3)阻滞剂组(MOP+SB203580),用p38 MAPK的特异阻滞剂SB203580预干预细胞1h后,加入含巴戟天多糖药物血清的DMEM/F12培养基体外培养第3代的BMSCs。体外培养3d,蛋白印迹法检测p38及其磷酸化产物的蛋白表达及用SB203580阻断p38MAPK信号后巴戟天多糖对RUNX2,OPN的影响;体外培养14d,ALP活性试剂盒检测BMSCs的成骨分化情况;体外培养21d,茜素红染色检测BMSCs钙结节的情况。结果:100g/L巴戟天多糖药物血清培养基为促(BMSCs)成骨的最佳浓度,差异有统计学意义(P<0.01);MOP组钙结节数量明显高于对照组和阻滞剂组,差异有统计学意义(P<0.01);与对照组比较,巴戟天组能提高细胞RUNX2,OPN的蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.01),提高了p38蛋白磷酸化表达,差异有统计学意义(P<0.05);p38特异性阻滞剂SB203580阻断p38 MAPK信号后巴戟天多糖促成骨作用明显下降,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:巴戟天多糖能促进BMSCs成骨分化,其作用可能与激活p38蛋白的表达有关。