双抗体夹心ELISA法测定猪α-干扰素的浓度

被引：6

作者：

蒋佳颖 ^{[1
,2
]}

王一成 ^{[2
]}

杨孝朴 ^{[1
]}

袁秀芳 ^{[2
]}

李军星 ^{[2
]}

徐丽华 ^{[2
]}

机构：

[1] 甘肃农业大学动物医学院

[2] 浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

来源：

浙江农业学报 | 2015年 / 27卷 / 05期

关键词：

猪α-干扰素; 双抗体夹心ELISA; 定量检测;

D O I：

暂无

中图分类号：

S852.4 [家畜免疫学];

学科分类号：

090602 ;

摘要：

为了能够准确测定猪血清中猪α-干扰素(Po IFN-α)含量及猪α-干扰素制品的浓度,本研究以制备并经过亲和层析提纯的兔抗猪α-干扰素Ig G多克隆抗体为包被抗体,以制备的鼠抗猪α-干扰素单克隆纯化抗体作为二抗,建立了测定猪α-干扰素浓度的双抗体夹心ELISA法(DAS-ELISA)。通过条件优化,最佳兔抗猪α-干扰素Ig G多克隆纯化抗体包被浓度为12.5μg·m L-1,最佳鼠抗猪α-干扰素单克隆纯化抗体作用浓度为6.25μg·m L-1,利用本实验室制备的已知浓度猪α-干扰素标准蛋白建立标准曲线,确定该方法检测猪α-干扰素浓度范围为0.0781～2.50μg·m L-1。与Lowry法、冻干称量法测定猪α-干扰素浓度相比较,3种方法检测结果无显著差异,但所建立的双抗体夹心ELISA法能够检测血清中猪α-干扰素浓度,且方法简便。

引用

页码：740 / 745

页数：6

共 11 条

[1] 酿酒酵母残留蛋白ELISA定量检测方法的建立 [J].