基于骨髓干细胞与肝细胞共培养体系的左归丸血清药理学研究

背景:课题组前期研究表明,左归丸含药血清可促进骨髓干细胞转化肝细胞,虽能排除骨髓干细胞与肝细胞的融合,但无法模拟体内骨髓干细胞与肝细胞的相互作用。目的:观察左归丸含药血清对骨髓干细胞转化肝细胞的影响。方法:利用透过性支持物(聚酯Transwell透明嵌套)建立骨髓干细胞与肝组织细胞共培养体系,实验分为空白血清组和左归丸含药血清组,前者在培养体系中加入10%正常大鼠血清,后者在培养体系中加入10%左归丸含药大鼠血清,骨髓干细胞与肝组织细胞共培养7,14,21,28,35d时分别取透过性支持物中的骨髓干细胞爬片用PAS法检测糖元,免疫细胞化学法检测肝细胞标志物甲胎蛋白、CK18、ALB的表达。结果与结论:10%含药血清组与空白血清组相比,在相同时间点糖原阳性细胞率增高,差异有显著性意义(P<0.01);共培养7d时,甲胎蛋白阳性细胞率显著增高(P<0.01);共培养14,21,28,35d时,甲胎蛋白阳性细胞率显著下降(P<0.05～0.01);相同时间点CK18、ALB阳性细胞率显著增高(P<0.05)。提示在骨髓干细胞与肝细胞共培养体系中使用左归丸含药血清是促进骨髓干细胞转化为肝细胞、并维持其肝细胞功能的较好培养条件。