ENU 诱导带 LacZ 靶基因的 λgt11 DNA 突变分子机理的初步研究

采用ＥＮＵ（乙基亚硝基脲）作用于裸露的λｇｔ１１ＤＮＡ，经体外重包装，转染宿主菌ＥｃｏｌｉＹ１０９０，在含底物Ｘ－ｇａｌ，诱导剂ＩＰＴＧ的选择性培养基上铺皿，发现被处理的λｇｔ１１ＤＮＡ除了使噬菌体存活率下降外，还出现了靶基因“ＬａｃＺ”较高频率的突变。其中以二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）为溶剂，当存活率分别为３５×１０－３、１６×１０－３和５５×１０－４时，相应的突变率依次为１１×１０－３、３２×１０－３和５２×１０－３，ＤＭＳＯ溶剂对照突变率则＜５０×１０－５。对ＥＮＵ诱导的５个阳性突变体进行了扩增，以ＰＣＲ产物为模板，采用正向引导，对阳性突变体靶基因ＬａｃＺ进行了部分测序，在被测序的２６０ｂｐ范围内，发现了９个位点的碱基突变。碱基突变的类型有颠换（６７％）、转换（１１％）和移码突变（２２％）。颠换主要以Ａ→Ｔ、Ｇ→Ｃ为主。似乎胞嘧啶（Ｃ）更易发生突变（占４３％）。