从豆科植物的根瘤中直接提取根瘤菌DNA的方法

被引：38

作者：

陈强

张小平

李登煜

陈文新

K.Lindstrm

Z.Terefework

机构：

[1] 四川农业大学农学院微生物学系

[2] 中国农业大学生物学院微生物学系

[3] Department of Applied Chemistryand Microbiology

[4] Department of Applied Chemistryand Microbiology 雅安

[5] 北京

[6] 雅安

[7] University of Helsinki

[8] Finland

来源：

微生物学通报 | 2002年 / 06期

关键词：

豆科植物; 根瘤; DNA提取; AFLP指纹图谱;

D O I：

10.13344/j.microbiol.china.2002.06.016

中图分类号：

Q933 [微生物遗传学];

学科分类号：

071007 ;

摘要：

豆科植物的新鲜根瘤经表面灭菌、破碎后直接加入 2 0 0 μL 4mol/L异硫氰酸胍 (GUTC)裂解液混匀 ,离心去掉根瘤残留物 ,再加入适量RNA酶 ,37℃温育 30min后 ,加入 2 0 μL硅藻土吸附液 ,室温处理 1 5min离心去掉上清 ,沉淀经GUTC裂解液二次处理 ,再分别用洗涤液、 70 %酒精洗涤。最后 ,硅藻土沉淀经真空干燥 ,加入 2 0 μL超纯水洗涤硅藻土沉淀 ,即可获得类菌体根瘤菌DNA。所获得的DNA可以用于AFLP、 1 6SrRNAPCR反应。

引用

页码：63 / 67

页数：5

共 5 条

[1]

农业微生物基因工程.[M].黄大〓主编;.科学出版社.2001,

[2]

化学试剂目录手册.[M].北京化学试剂公司编;.北京工业大学出版社.1993,

[3] 植物根瘤内痕量Frankia DNA的提取及鉴定 [J].