脑脊液病原菌16S rRNA微型寡核苷酸芯片检测方法的初步研究

被引：4

作者：

毕春霞 ^{[1
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武静 ^{[2
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张德坤 ^{[1
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苏维奇 ^{[1
]}

刘成玉 ^{[3
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闫志勇 ^{[4
]}

机构：

[1] 青岛市市立医院检验科

[2] 海军青岛保障基地医院

[3] 青岛大学医学院临床检验诊断学教研室

[4] 青岛大学医学院微生物学教研室

来源：

青岛大学医学院学报 | 2006年 / 03期

关键词：

脑脊髓液; 细菌; 寡核苷酸芯片; 寡核苷酸序列分析;

D O I：

暂无

中图分类号：

R450 [];

学科分类号：

100215 ;

摘要：

目的初步建立一种脑脊液标本中常见病原菌的快速检测方法。方法根据脑脊液标本中常见病原菌16S rRNA基因保守区的序列设计用于基因扩增的通用引物,制备细菌的通用探针、革兰阳性和阴性菌通用探针,以及肠杆菌科属、嗜血杆菌属和脑膜炎奈瑟菌、金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎链球菌、产单核李斯特菌的属或种特异性探针,将探针加尾后固定于尼龙膜上制成寡核苷酸芯片。提取标本中病原菌DNA后用通用引物行PCR扩增,扩增过程中用生物素标记;将产物变性后分别与点有各种探针的尼龙膜反向杂交,检测脑脊液中细菌的感染情况。结果所有探针均只与其相应的细菌DNA扩增产物反应产生杂交信号。结论建立的脑脊夜病原菌寡核苷酸芯片能够准确、敏感、快速、高效地检测脑脊液标本中病原菌的感染情况。

引用

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