3H－精氨酸转化测定一氧化氮合酶活性

目的建立３Ｈ－精氨酸转化测定原生型和诱生型一氧化氮合酶的方法。方法以二乙氨乙基（ＤＥＡＥ）纤维素柱层析和２′、５′－ＡＤＰ琼脂糖亲合层析法纯化牛、猪及大鼠小脑一氧化氮合酶、用３Ｈ－精氨酸转化法测定一氧化氮合酶活性。结果猪、大鼠小脑组织匀浆一氧化氮合酶活性分别为６６９、６８８ｐｍｏｌ·ｍｇ－１·ｍｉｎ－１分别纯化了４４６０倍、２６４６倍。获得率分别为２．７％、２７％。纯化后的猪和大鼠小脑一氧化氮合酶分子量为１６００００结论通过对３Ｈ－精氨酸转化生成３Ｈ－胍氨酸的量效和时效，以及各种影响因素的研究，建立了可以区别测定原生型一氧化氮合酶和诱生型一氧化氮合酶活性的测定体系。