部分酶解酵母高效电击转化研究

被引：2

作者：

徐明良

杨金水

高嵩

钱旻

葛扣麟

机构：

[1] 复旦大学遗传学研究所

[2] 复旦大学遗传学研究所上海

[3] 上海

来源：

微生物学报 | 1996年 / 06期

关键词：

部分酶解; 酵母; 电击; 转化;

D O I：

10.13343/j.cnki.wsxb.1996.06.005

中图分类号：

Q933 [微生物遗传学];

学科分类号：

071007 ;

摘要：

以酵母质粒YCp50为外源DNA,电击转化部分酶解酵母宿主菌AB1380,转化效率稳定在10～6转化子/μg质粒DNA左右,比不酶解酵母或酵母原生质球作受体的电击转化效率高一个数量级以上,也比PEG介导的酵母原生质球转化高3～5倍,而且适合于大片段DNA如水稻YAC分子的转化。达最佳转化时的有关技术参数为:新接菌种通气培养至细胞密度1×10～8～1.5×10～8个/ml;转化时细胞密度控制在1×10～9～1.5×10～9个/ml;每毫升酶解缓冲液加15u溶菌酶(lyticase),30℃下处理酵母5min进行部分酶解;电击时,电场设置在6.25kV/cm、电容25μF,电击后直接铺板。

引用

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