NGAL基因5’侧翼区转录调控元件萤火虫荧光素酶报告基因表达载体的构建与鉴定

被引:5
作者
许丽艳
李恩民
蔡唯佳
沈忠英
曾毅
机构
[1] 汕头大学医学院肿瘤病理研究室
[2] 汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室
[3] 北京工业大学生命科学院 广东 汕头 北京工业大学生命科学院
[4] 北京
[5] 广东 汕头
[6] 北京
基金
广东省自然科学基金;
关键词
NGAL基因; 基因表达调控; 荧光素酶; 报告基因; 载体构建;
D O I
暂无
中图分类号
R73-3 [肿瘤学实验研究];
学科分类号
摘要
背景与目的:构建NGAL基因5’侧翼区转录调控元件萤火虫荧光素酶报告基因表达载体。材料与方法:以PCR法从SHEEC食管癌细胞基因组DNA中扩增NGAL基因5’侧翼转录调控区不同长度片段G0-G6(-1431-+84)。PCR产物经pGEM-Teasy转载,再定向亚克隆插入pGL3-Basic。重组子通过特异限制性内切酶切割,琼脂糖电泳予以鉴定。结果:成功构建NGAL基因5’侧翼区转录调控元件萤火虫荧光素酶报告基因表达载体7个,pGLB-G0-G6。结论:为借助于双荧光素酶报告基因检测系统研究确定NGAL基因5’侧翼转录调控区转录调控元件的分布特点以及转录调控元件与转录调控蛋白之间相互作用的性质提供了基本实验条件。
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