柑桔溃疡病菌PCR快速检验检疫技术研究

被引:31
作者
王中康
孙宪昀
夏玉先
周常勇
殷幼平
机构
[1] 重庆大学基因工程研究中心
[2] 西南农业大学植保学院
[3] 中国农业科学院柑桔研究所
[4] 重庆大学基因工程研究中心 生物力学与组织工程教育部重点实验室
[5] 重庆
[6] 生物力学与组织工程教育部重点实验室
关键词
Xanthomonas axonopodis pv.citri; 柑桔溃疡病; PCR; 检疫;
D O I
10.13926/j.cnki.apps.2004.01.003
中图分类号
S436.661.12 [];
学科分类号
090401 ; 090402 ;
摘要
柑桔溃疡病是严重影响全世界柑桔生产的重大检疫性病害,根据柑桔溃疡病菌(Xanthomonas axonopodis pv.citri)新近公布的全基因组中独有的保守蛋白基因序列,设计筛选出一对种特异性引物(JYF5/JYR5),能专一地扩增检出柑桔组织表面所带溃疡病菌的DNA靶带(413 bp)。而柑桔叶面附生的非致病性黄单胞菌、野油菜黄单胞菌近缘种以及健康柑桔样品都不能扩增;靶细菌DNA检测下限1.56 pg/μL,靶细菌悬浮液检测下限10 cfu/μL;在不同PCR仪及各种控温方式下都能稳定地扩增出特征性靶带。这一特异、准确的柑桔溃疡病菌PCR检验技术和研制的预包被固相化PCR检测试剂盒已开始用于我国非疫生产区建设中柑桔苗木、果实的病害检疫检验。
引用
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共 3 条
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精编分子生物学实验指南[M]. 科学出版社 , (美)F.M.奥斯伯等主编, 2005
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5420009 Detection of xanthomonas campestris pv. citri by hybridization and polymerase chain reaction assays[J] . Biotechnology Advances . 1996 (3)
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Synopsis on the taxonomy of the genus Xanthmonas. Vauterin L, Rademarker J, Swings J. Phytopathology . 2000