牛传染性鼻气管炎病毒重组gE蛋白间接ELISA诊断方法的建立

被引:10
作者
王海燕 [1 ]
朱远茂 [1 ]
薛飞 [1 ]
童光志 [1 ]
赵立平 [1 ]
相文华 [1 ]
韩文瑜 [2 ]
机构
[1] 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
[2] 吉林大学农学部
关键词
牛传染性鼻气管炎; 牛疱疹病毒I型; 糖蛋白gE; 酶联免疫吸附试验;
D O I
10.13523/j.cb.20051206
中图分类号
S854.43 [];
学科分类号
0906 ;
摘要
以重组牛传染性鼻气管炎病毒gE蛋白,经纯化后作为诊断抗原建立了检测牛血清特异性gE抗体的间接酶联免疫吸附试验,确定其最佳包被量为每孔1.075μg。样品稀释度为1:40,兔抗牛IgG辣根过氧化物酶标记抗体稀释度为1∶5000。判定标准为样品OD值大于0.582为阳性,小于0.472为阴性,在0.472与0.582之间为可疑。经抗特异性试验和重复性试验证明该方法特异性高、重复性好。在403份血清样品中,进口试剂盒检出234份阳性样品,该诊断方法检出248阳性样品,与进口试剂盒的符合率为94.3%,但该诊断方法检出率更高。在43份血清样品中,中和试验检出24份阳性样品,该诊断方法检出28份阳性样品,与中和试验的符合率为85.7%。应用该诊断方法调查了我国部分地区IBRV的感染率,发现这些地区的IBRV感染率为68.7%。
引用
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共 12 条
[1]   刚察地区牛传染性鼻气管炎的血清学调查 [J].
杨春明 .
青海畜牧兽医杂志, 2003, (02) :39-39
[2]  
Lymphocyte proliferativeresponsestoseparatedbovineherpesvirus1proteins inimmunecattle. HutchingsDL,VanDrunenL,HurkS,etal. Journal of Virology . 1990
[3]  
Asimple,specific,andhighlysensitiveblockingEnzyme linkedimmunosorbent assayfordetedtionofanitbodiestobovineherpesvirus1. KrampsJA,MagdalenaJ,QuakJ,etal. Journal ofClinicalMicrobiology . 1994
[4]  
CharacterizationofBoHV1gEenvelopeglycoproteinmimotopesobtainedbyphage display. LehmannD,SodoyerR,LetermeS. Veterinary Microbiology . 2004
[5]  
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[6]  
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[7]  
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[8]  
Bovineherpesvirus1. GibbsEPJ,RweyemammuMM. Veterinary Bulletin . 1997
[9]  
Herpessimplexvirustype1andbovineherpesvirus1latency. JonesC. Clinical Microbiology Reviews . 2003
[10]  
Eradicationof infectiousbovinerhinotracheitisinSwitzerland:reviewand prospects. AckermannM,MullerHK,BrucknerL,etal. Veterinary Microbiology . 1990