目的 建立定量检测体外培养软骨细胞外基质中糖胺多糖 (GAG)含量的方法 ,以评价体外培养骺板、关节及肋软骨细胞的生物学功能活性。 方法 改进的二甲基亚甲蓝 (DMB)比色法测定细胞外基质的糖胺多糖含量 ,细胞 -玻片甲苯胺蓝 (TB)染色光镜观察。 结果 原代软骨细胞具有最高的GAG分泌活性 ,骺板 (70 .12± 7.72 ) μg cm2 ,关节 (92 .0 0± 10 .15 ) μg cm2 ,肋软骨(80 .61± 11.40 ) μg cm2 ,至第三代则出现了非常明显的下降 ,骺板 (5 3 .2 7± 9.5 0 ) μg cm2 ,关节 (63 .88± 11.92 ) μg cm2 ,肋软骨 (5 8.94± 8.2 1) μg cm2 ;TB染色结果与GAG含量变化相一致。三种软骨细胞间比较差异无显著性意义。 结论 在体外培养过程中 ,软骨细胞随传代次数的增加而其功能活性逐渐降低 ,第三代以后的软骨细胞不适于作为组织工程种子细胞。DMB比色法准确、灵敏 ,可作为一种用于评价体外培养软骨细胞功能活性的有效分析方法。