双色荧光定量PCR快速分型、定量高危型人乳头状瘤病毒

目的针对高危型人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)亚型的多样性以及感染病毒载量的高低,旨在建立高危型HPV的定量与分型的快速检测方法,为HPV筛查与治疗提供依据。方法利用2种荧光染料分别标记HPV-16、HPV-33/52/58/67和HPV-18/45、HPV-31探针,同时以β球蛋白基因作为内对照,对120份疑为HPV感染的宫颈脱落细胞样本进行HPV分型与定量,定量范围为5×10～1～5×10～7拷贝/ml,以HC-2杂交捕获法作为"金标准",评价该方法的特异性与灵敏度。结果荧光定量PCR阳性检出率为52.5%(63/120),其中HPV-16、HPV-18/45、HPV-31和HPV-33/52/58/67阳性率分别为36.51%(23/63)、11.11%(7/63)、12.70%(8/63)、58.73%(37/63);HPV感染的平均病毒载量为1.08×10～7拷贝/ml。荧光定量PCR的特异性为100%,灵敏度为81.82%。结论双色荧光定量PER能快速分型、定量高危型HPV,可用于HPV感染的筛查与宫颈病变程度预测以及疗效观察。