黄芪多糖对高糖腹透液诱导HMrSV5细胞凋亡的影响

目的观察黄芪多糖（Astragalus polysaccharide,APS）对高糖腹透液（peritoneal dialysis solution,PDS）诱导人腹膜间皮细胞（HMrSV5）凋亡的影响及其抗凋亡机制。方法 （1）体外培养HMrSV5细胞株,CCK-8法检测不同浓度PDS（1.5%、2.5%、3.0%、3.5%、4.25%PDS）及不同浓度APS(50、75、100、200、300、400、500、600、800μg·mL-1)对细胞活力的影响,根据CCK-8检测结果筛选用于后续实验PDS及APS的合适浓度;（2）将实验分为4组:空白组、APS(100μg·mL-1)组、PDS（3.0%）组、PDS+APS(3.0%+100μg·mL-1)组,相差显微镜观察细胞形态变化,通过JC-1法测定线粒体膜电位的去极化;TUNEL技术检测各组细胞凋亡情况;（3）Western Blot检测Bcl-2、Bax、Caspase-3、Cleaved Caspase-3蛋白的表达。结果 （1）不同浓度PDS作用下HMrSV5细胞活力均下降,呈浓度依赖（P<0.01）;25～100μg·mL-1的APS能提高PDS对HMrSV5细胞的抑制作用,且100μg·mL-1APS组最显著（P<0.01）。（2）与空白组相比,PDS模型组细胞形态变小、拉长,细胞内出现空泡样变,线粒体膜电位下降,细胞凋亡率增加;与PDS模型组比较,PDS+APS组细胞形态有所恢复,细胞内空泡样变减轻,线粒体膜电位水平升高,细胞凋亡率降低。（3）与空白组相比,PDS模型组Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达显著增加,Bcl-2蛋白表达降低（P<0.05）;与PDS模型组相比,PDS+APS组Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高（P<0.05）。结论 APS能改善高糖腹透液对HMrSV5细胞诱导的凋亡,其机制可能是影响与线粒体凋亡相关的Bcl-2、Bax和Cleaved Caspase-3蛋白表达。