低氧对胚胎干细胞增殖的影响

目的 :观察间歇性低氧和持续性低氧对体外培养的胚胎干细胞 (ES细胞 )增殖的影响。方法 :利用细胞记数法和BrdU (5 溴脱氧尿苷 )掺入的流式细胞分析检测细胞增殖 ,并用RT PCR的方法检测低氧诱导因子 (HIF 1a)的表达变化。结果 :①将ES细胞分别放在低氧 (3%～ 10 %O2 )和常氧 (2 0 %O2 )的环境中培养 2 4h后 ,在低氧环境中培养的ES细胞数较常氧组明显减少 ;②将ES细胞分别给予间歇性低氧刺激 (3%～ 10 %O2 ) ,每天 10min ,连续 4d后 ,发现 3%低氧组较常氧对照组的细胞增殖明显升高。③用RT PCR方法观察HIF 1a的表达与细胞增殖的关系 ,发现在常氧环境中培养的ES即有HIF 1a的表达 ,ES细胞在持续低氧 2 4h或间歇性低氧 (3%～ 10 %O2 )刺激 4d后对HIF 1a的表达均无明显影响。结论 :间歇性低氧 (3%O2 )可明显促进体外培养的ES细胞增殖 ,而持续性低氧抑制ES细胞增殖 ,间歇性低氧 (3%O2 )刺激促进ES细胞增殖的机制尚有待于进一步的研究