血清及高密度脂蛋白中对氧磷酶活性的分光光度测定法

目的　在现有的实验条件下 ,获得稳定可靠的血清及高密度脂蛋白 (high density lipoprotein,HDL)中对氧磷酶 (paraoxonase,PON)活性的测定方法。方法　以乙酸苯酯为底物 ,在对氧磷酶的作用下水解 ,生成产物苯酚 ,测定 5分钟内反应体系中在 2 70 nm处苯酚特征性的紫外吸收 ,换算为酶促反应速度。结果　通过观测底物浓度、p H、激活剂 Ca2 + 、抑制剂 EDTA等对酶促反应的影响 ,得出最适的测定条件 :底物浓度为 5 m mol/ L ,最适 p H为 8.0 ,必需激活剂 Ca2 +浓度为 2 mmol/ L。结论　在该反应条件下 ,测定不同浓度 HDL 或血清中该酶的活性 ,重复性和稳定性均符合要求