华蟾素诱导U937细胞凋亡及其作用机制

目的:研究华蟾素诱导白血病U937细胞凋亡,探讨其可能的作用机制。方法:MTT法检测细胞存活率,瑞氏染色及荧光染色观察细胞凋亡形态学改变,琼脂糖凝胶电泳观察DNA片段化改变,TdT原位标记计算凋亡率,流式细胞术检测bcl-2表达,半定量RT-PCR检测Fas和Fas-1 mRNA水平。结果:与对照组相比,0.225～1.8μg/mL华蟾素作用1～3 d明显抑制U937细胞生长,具有剂量-时间相关性,24 h时的IC50为1.36μg/mL。0.9μg/mL华蟾素作用1 d,U937细胞出现凋亡典型形态学改变;DNA电泳出现凋亡特有“梯子”条带。0.225、0.45和0.9μg/mL华蟾素作用1 d,TdT原位标记检测凋亡率分别为4.8%、13.57%和24.33%。凋亡细胞bcl-2表达及Fas-lmRNA水平下降,Fas mRNA水平增高。结论:华蟾素可能通过抑制bcl-2、Fas-1基因及活化Fas基因的途径来抑制U937细胞生长并诱导凋亡。