一组新的沙蚕蛋白酶同工酶的分离纯化与鉴定

被引：7

作者：

李奇 ^{[1
]}

王昭 ^{[2
]}

洪敏 ^{[1
]}

机构：

[1] 吉林大学基础医学院生物化学教研室

[2] 佳木斯大学医学院生物化学教研室

来源：

中国生物化学与分子生物学报 | 2008年 / 04期

关键词：

沙蚕蛋白酶同工酶; 纯化; 鉴定;

D O I：

10.13865/j.cnki.cjbmb.2008.04.011

中图分类号：

Q814 [酶工程];

学科分类号：

082203 ;

摘要：

分离纯化一组新的沙蚕蛋白酶同工酶,并对其性质进行鉴定.用硫酸铵盐析、凝胶过滤层析和疏水层析技术从沙蚕中分离得到了沙蚕蛋白酶,经聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）、高效液相色谱（HPLC）、等电聚焦电泳（IEF）和质谱分析（MS）鉴定,发现沙蚕蛋白酶由3个组分组成,均有纤溶活性,其等电点为3·5～4·5,分子量分别为29248·75、29007·66、28954·17,肽指纹图谱分析发现,它们均为未知的新蛋白质,其中2个组分结构相似,具有较高的同源性,与另1个有不同.用抗原抗体反应鉴定其免疫原性,发现3个组分中有2个组分具有相同的免疫原性,另1个组分与2者不同.但3者具有相同的抗原决定簇,证明沙蚕蛋白酶由2个同工酶组成.以4种专一性的抑制剂对其进行抑制,检测酶的活性确定其酶学性质,发现其反应的适宜温度为40℃50℃、适宜pH值为8～9.沙蚕蛋白酶属于丝氨酸蛋白酶.

引用

页码：358 / 364

页数：7

共 15 条

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