通用引物PCR方法在地表水病原菌检测中的应用

被引：16

作者：

刘永军 ^{[1
]}

张崇淼 ^{[1
]}

王晓昌 ^{[1
]}

孙茵 ^{[1
]}

薛小平 ^{[2
]}

机构：

[1] 西安建筑科技大学环境与市政工程学院西北水资源与环境生态教育部重点实验室

[2] 西北工业大学生命科学院

来源：

环境科学研究 | 2007年 / 02期

关键词：

通用引物; 病原菌; 聚合酶链式反应(PCR); 地表水;

D O I：

10.13198/j.res.2007.02.91.liuyj.018

中图分类号：

X832 [水质监测];

学科分类号：

0804 ; 082803 ;

摘要：

为了探索通用引物PCR方法在地表水病原细菌检测中的应用价值,利用16S rRNA基因的高度保守性,设计并合成细菌的通用引物,采用合成的引物扩增参考菌株及西安市区不同地表水样,并对PCR产物分别进行序列测定及序列同源性分析,同时检测水样中的细菌总数和粪大肠杆菌浓度.结果显示,通用引物扩增4种参考菌株,320 bp处均可得到清晰的电泳条带,其特异性通过序列测定及同源性分析得到进一步验证;通用引物PCR可检出250 ng/L的埃希氏大肠杆菌标准菌株DNA,其PCR检测的灵敏度可达0.275 CFU/mL;用通用引物对西安市区不同地表水样进行PCR扩增,其中河、兴庆湖、大唐芙蓉园北湖、北石桥污水处理厂出水样品320 bp处都得到了清晰的电泳条带,而黑河水样没有条带;与之相对应的粪大肠杆菌群检测结果显示,只有北石桥污水处理厂出水和兴庆湖水样有粪大肠杆菌检出.

引用

页码：89 / 93

页数：5