黄芪甲苷对Aβ1-42诱导的体外血脑屏障模型损伤的影响及机制探究

目的探究黄芪甲苷对纤维状Aβ1-42诱导的体外血脑屏障（BBB）模型损伤的影响及可能机制。方法制备Aβ1-42诱导的小鼠脑微血管内皮细胞b End.3和原代大鼠星形胶质细胞As非接触式共培养BBB模型,分为对照组、模型组(Aβ1-4230μmol/L)及黄芪甲苷低、高剂量（50、200μmol/L）组;利用噻唑蓝（MTT）法检测黄芪甲苷对Aβ1-42诱导的b End.3细胞活力的影响;通过检测荧光素钠透过体外BBB模型的量鉴定BBB的通透性;Western blotting法检测细胞凋亡执行蛋白半胱天冬蛋白酶-3（Caspase-3）、活化的半胱天冬蛋白酶-3（cleaved Caspase-3）的表达水平以及BBB内皮细胞间相关连接蛋白细胞质透明带蛋白-1（ZO-1）、Claudin-5、Occludin的表达水平。结果 MTT结果显示,与模型组比较,黄芪甲苷低、高剂量组均能显著提高b End.3细胞活性（P<0.001）,且保护作用与黄芪甲苷浓度呈正相关;荧光素钠通透性实验结果显示,与模型组相比较,黄芪甲苷预处理可显著降低BBB的通透性（P<0.001）。Western blotting结果显示,与模型组比较,黄芪甲苷预处理后,cleaved Caspase-3/Caspase-3显著降低,ZO-1、Claudin-5、Occludin蛋白的表达水平显著增加（P<0.001）。结论黄芪甲苷可能是通过抑制Aβ1-42诱导的脑微血管内皮细胞b End.3的凋亡及增加其连接蛋白表达而发挥BBB保护作用。