噬菌体显示技术改造人干扰素α1c/86D的研究

被引:10
作者
马学军
胡荣
吕海
魏开坤
张丽兰
薛水星
侯云德
机构
[1] 中国预防医学科学院病毒学研究所!病毒基因工程国家重点实验室,北京,中国预防医学科学院病毒学研究所!病毒基因工程国家重点实验室,北京,中国预防医学科学院病毒学研究所!病毒基因工程国家重点实验室,北京,中国预防医学科学院病毒学研究所!病毒基因工程国家
关键词
噬菌体表面显示; 肽库; 人α1型干扰素;
D O I
暂无
中图分类号
R346 [];
学科分类号
1001 ;
摘要
利用噬菌体表面显示技术表达具生物活性的干扰素α1c,并通过构建和筛选突变文库 ,以得到高受体结合能力和高比活性的新α1c干扰素 .利用噬菌粒载体pCANTAB5E表达了人IFNα1c/ 86D基因 ,利用随机 6肽库和干扰素的中和抗体推导干扰素α1c的受体结合区及关键性结合残基 ,运用盒式突变构建了基于AB环的突变库 ,其中氨基酸 2 9,3 1,3 2 ,3 5位完全随机化 ,并直接利用WISH细胞选择出高抗病毒活性的干扰素突变体 .结果获得了 3个重组噬菌体干扰素突变体 ,其抗病毒活性是干扰素母体的 4~ 16倍 .这一结果为国内外首次报道利用噬菌体表面显示技术的筛选表达优势改造干扰素以提高抗病毒活性 ,实验结果说明了其可行性 ,并提示干扰素突变体的比活性有可能较母体高 .
引用
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页码:209 / 216
页数:8
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