一种快速提取细菌总DNA的方法研究

被引:35
作者
郑维 [1 ]
权春善 [2 ]
朴永哲 [2 ]
范圣第 [2 ]
机构
[1] 大连理工大学环境与生命学院
[2] 大连民族学院生命科学学院
关键词
细菌染色体DNA; 高温; 酶切; 16S rRNA; 环境DNA;
D O I
10.13523/j.cb.20060414
中图分类号
Q933-3 [];
学科分类号
摘要
随着分子生物学技术应用于环境微生物研究的深入开展,占自然界微生物物种总数90%以上的不能人工培养或培养困难的微生物,已经可以借助分子生物学技术进行功能基因的开发和利用。而快速得到纯度较高,结构完整的细菌染色体DNA成为这一技术得以实现的前提。报道了利用高温处理和SDS的裂解作用相结合,而建立的一种快速、简便的提取细菌染色体DNA 的方法。经过脉冲电泳实验证明,利用本方法提取到的几种革兰氏阳性和革兰氏阴性菌株的基因组DNA结构完整,并且无明显降解,无须经过纯化,可以直接进行PCR扩增和酶切等分子生物学操作。将此方法进一步应用于土壤环境DNA的提取方面,同样达到了快速得到大片段、高质量的环境微生物基因组的目的,为研究未培养的环境微生物多样性打下了坚实的基础,同时为环境基因组的提取提供了一个新的途径。
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