人肺巨细胞癌高和低转移株中相关转录因子分析

目的 :为了阐明人肺巨细胞癌高转移株 (95D)细胞高表达uPA、低转移株 (95C)细胞低表达uPA的原因 ,分析两株细胞中有关的转录因子的差异。方法 :uPA基因启动子不同片段与Luciferase报告基因的融合基因真核表达质粒分别平行转染 95C、95D细胞 ,比较活性 ;用EMSA分析 95D、95C细胞中与寡核苷酸探针特异结合的转录因子差异 ;用RT PCR分析两株细胞中相应转录因子mRNA相对表达水平。结果 :三个不同长度的uPA基因启动子在 95D细胞中的活性均相应高于 95C细胞中的活性 ,分别是 95C细胞的 1 32、1 6 6和 1 6 1倍 ,EMSA表明95D细胞中与AP1、AP2、NFκB及SP1探针结合的转录因子量均高于 95C细胞中 ;RT PCR表明AP2、NKκB及SP1转录因子mRNA表达水平分别是 95C细胞的 1 5 7、1 77和 1 2 8倍。结论 :转录因子AP1、AP2、NKκB及SP1在95D细胞中含量高于 95C细胞可能是uPA在 95D与 95C细胞中表达差别的原因之一。