红细胞醛糖还原酶测定荧光法的建立及临床应用

目的红细胞醛糖还原酶测定荧光法的实验探讨。方法利用NADPH、DL一甘油醛、磷酸缓冲液和适量红细胞溶血液组成的反应体系，建立了一种红细胞醛糖还原酶（AR）的荧光测定法，并对酶反应最适条件进行了实验探讨。结果发现所加溶血液量在工～10μl范围内，随所加量的增多，反应后NADPH消耗也逐渐增加，二者呈良好的线形相关。反应时间在l～8分钟内，随反应时间的延长，反应后NADPH消耗逐渐增加，二者有良好的相关性。PH6．0～6．5时反应后NADPH的消耗最大。反应温度对测定结果影响不明显。重复性实验表明，该方法的批内变异系数（CV）5．27％；批间变异系数（CV）8．98％。应用该方法测定了10例正常人和210例糖尿病患者的红细胞AR活性。结论糖尿病患者AR活性显著高于正常人（P＜O．01），且AR活性与血糖值呈正相关（P＜O．01）。本研究为深入了解AR与糖尿病慢性并发症（DCC）发生、发展的关系，提供了一种较为简单而可靠的检测方法。