目的基因全长cDNA合成及克隆技术进展

被引：6

作者：

张光祥

马正强

机构：

[1] 南京农业大学作物遗传与种质创新国家级重点实验室

来源：

生物技术通报 | 2003年 / 05期

关键词：

全长cDNA; 反转录; RNA分子伴侣; 5′末端帽子结构; mRNA二级结构; 5′-RACE; cDNA文库;

D O I：

10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2003.05.001

中图分类号：

Q785 [转化及克隆];

学科分类号：

摘要：

在基因克隆、基因功能和表达调控研究中 ,获得目的基因尤其是表达丰度低的基因全长cDNA仍然是一个技术难题。本文对近年来有关反转录过程中影响全长cDNA合成的因素与对策的研究进行了总结 ,特别对消除mRNA二级结构阻碍的方法及其效果、较高反应温度和金属离子对模板mRNA完整性的影响、RNA分子伴侣在反应温度不变的情况下改善cDNA第一链质量的效果等作了较为详细的介绍。此外 ,还介绍了确保具有完整5′端的cDNA进入后续研究的几种新方法。

引用

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