不同浓度甲氨蝶呤对外周血单个核细胞表达和分泌白细胞介素-17的影响

被引:2
作者
厉彦山 [1 ]
姜林娣 [1 ]
张思 [2 ]
殷莲华 [3 ]
马莉莉 [1 ]
陈慧勇 [1 ]
王臻 [1 ]
机构
[1] 复旦大学附属中山医院风湿内科
[2] 复旦大学上海医学院基因中心
[3] 复旦大学生理与病理生理学系
关键词
白细胞介素17; 甲氨蝶呤; 关节炎,类风湿; 单个核细胞;
D O I
暂无
中图分类号
R593.22 [类风湿性关节炎];
学科分类号
100201 [内科学];
摘要
目的体外观察不同浓度的甲氨蝶呤(MTX)对外周血单个核细胞(PBMCs)表达和分泌白细胞介素(IL)-17的影响,探究MTX有效治疗类风湿关节炎(RA)的可能机制。方法分离RA患者和健康人PBMCs,予不同浓度MTX预处理,抗人CD3和抗人CD28刺激后,37℃体积分数为0.05的CO2培养箱培养。分别于培养的不同阶段收集细胞或上清液,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术分析IL-17 mRNA的表达水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞培养液中IL-17的浓度;荧光抗体标记细胞表面抗原CD4和胞内蛋白IL-17,流式细胞仪分析CD4+IL-17+细胞的比例。结果比较采用两两配对t检验或独立样本t检验。结果浓度为0.1、1.0、5.0、25.0μg/ml MTX组IL-17 mRNA/GAPDH比值分别为(0.58±0.09、0.48±0.11、0.50±0.09、0.51±0.14),与无药抗体组(0.76±0.08)组间两两比较差异有统计学意义(P<0.01);IL-17分泌水平则分别为(121±54)、(104±45)、(90±36)、(115±41)pg/ml,与无药抗体组(370±187)pg/ml组间两两比较差异有统计学意义(P<0.01);MTX处理组CD4+IL-17+细胞比例的平均值下降,但统计学检验差异无统计学意义(P>0.05)。结论 MTX可以有效抑制PBMCs合成和分泌IL-17,而且在一定的剂量下即可发挥显著作用,加大剂量并不能增强该作用。
引用
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共 3 条
[1]
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