重组葡激酶(r-Sak)的分离、纯化和结晶

被引:13
作者
汤其群
张小璇
于敏
宋后燕
机构
[1] 上海医科大学分子遗传学研究室!上海
关键词
重组葡激酶; 纯化和鉴定; 结晶;
D O I
10.19526/j.cnki.1005-8915.1997.01.001
中图分类号
Q55 [酶];
学科分类号
071010 ; 081704 ;
摘要
通过葡激酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达 ,表达产物 r- Sak以可溶性、活性状态存在于胞浆内。本文报道用离子交换和凝胶过滤纯化 r- Sak的简易路线 ,从每升发酵液可得纯度 98%以上 ,比活性 10万 HU/ mg的 r- Sak30 0 mg以上 ,比国外报导道 6倍。r- Sak的理化特性和 N末端 15个氨基酸顺序与天然 Sak十分相似。利用纯化的 r- Sak已成功地制备了晶体。
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[1]  
Nucleotide sequence of thestaphylokinase gene from Staphylococcuse aureus. Sako T,Tsuchida N. Nucleic Acids Research . 1983