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半套式PCR扩增人抗体基因以增加抗体库的多样性
被引：7
作者：
王学
王海涛
陈万荣
鲍作义
徐静
机构：
[1] 军事医学科学院微生物学流行病学研究所
来源：
关键词：
半套式PCR；引物设计；抗体库；多态现象；聚合酶链反应；抗体，单克隆；免疫球蛋白类;
D O I：
暂无
中图分类号：
Q78 [基因工程（遗传工程）];
学科分类号：
071007 ;
0836 ;
090102 ;
摘要：
用重链５′末端８条引物（ＶＨ１ａ、ＶＨ３ａ、ＶＨ１ｆ、ＶＨ３ｆ、ＶＨ２ｆ、ＶＨ４ｆ、ＶＨ６ａ、ＶＨ６ｆ）和３′末端１条引物（ＣＧ１ｚ）以及轻链５′末端９条引物（ＶＫ１ａ、ＶＫ２ａ、ＶＫ３ａ及ＶＬ１、ＶＬ２、ＶＬ３、ＶＬ４、ＶＬ５、ＶＬ６）和３′末端２条引物（ＣＫ１ｚ和ＣＬ２）ｃＤＮＡ为模板我疫球蛋白基因进行ＰＣＲ扩增。结果表明，重链的扩增率为５０％，。轻链的扩增率为４４％。而先用信号肽序列为引物和以上的３′末端引物以ｃＤＮＡ为模板先进行第一次ＰＣＲ，然后以该产物为模板再用以上方法进行第二次ＰＣＲ时，不仅所有的引物都能扩增出来，而且其产量要比进行一次ＰＣＲ的产量多得多。这表明用半套式ＰＣＲ扩增人抗体基因能够增加抗体库的多样性
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