自制免疫胶体金层析条检测恶性疟原虫的初步研究

目的　建立一种简易快速、适合于基层使用的自测式免疫胶体金层析 (GICA)法用于恶性疟原虫的检测。方法　采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒 ,标记抗恶性疟原虫乳酸脱氢酶(LDHpf)单抗 2A5 ,并以另外 4株单抗作为包被抗体 ,制成诊断恶性疟原虫的免疫层析条 ,探索最佳配对模式及估计最低检测量。以镜检和PCR法为对照 ,用GICA条检测门诊“四热”病人血样 ,评价其敏感性和特异性 ,并对其稳定性进行了初步研究。结果　GICA检测重组LDHpf,最低检测量为 1ng。以镜检法和PCR法为标准 ,GICA条检测恶性疟原虫的敏感性分别为 88.37%和 86 .6 7% ,GICA与镜检法的符合率均为 91.5 5 %。并且当虫体密度 >2 0 0个 μl时 ,GICA的敏感性为 10 0 %。GICA条在 4℃下可保存 3个月以上。结论　GICA检测恶性疟原虫简易快速、灵敏度高 ,无需特殊仪器设备 ,有望成为一种恶性疟原虫快速免疫诊断试剂盒