大黄素在体外诱导人肝癌细胞smmc-7721凋亡的实验研究

目的:研究Emodin(大黄素)对人肝癌细胞smmc-7721的作用及探讨其诱导人肝癌细胞凋亡的分子机制。方法:肝癌细胞smmc-7721经emodin(大黄素)处理后,用MTT法观察emodin对肝癌细胞株smmc-7721细胞增殖的抑制作用,荧光显微镜、DNA凝胶电泳、流式细胞仪分析诱导凋亡作用,采用western blot检测p53、p21蛋白水平变化,采用细胞免疫组化方法检测Fas的表达变化。结果:与对照组相比,emodin能明显抑制smmc-7721细胞的生长,其IC50为49.6umol/L.荧光显微镜观察示emodin处理的肝癌细胞胞核内可见浓染致密的颗粒荧光,典型细胞可见新月型改变,固缩或片段化的核。DNA凝胶电泳可见典型的梯状条带,细胞凋亡与emodin作用的浓度和时间相关。流式细胞DNA直方图上出现典型的亚二倍体"凋亡峰",emodin能浓度依赖地诱导smmc-7721细胞发生G2/M期阻滞。Emodin处理smmc-7721细胞后,western blot检测结果显示p53、p21蛋白表达明显增加,免疫组化方法检测结果显示Fas的表达明显增强。结论:emodin对人肝癌细胞smmc-7721株有强烈的增殖抑制作用,其分子机制可能是诱导smmc-7721细胞发生凋亡。Emodin诱导smmc-7721细胞发生凋亡是p53依赖性的,即与p53、p21有关,并且Fas表达水平的上调在此过程中也起了一定作用。