可溶性PTA1分子的发现及其检测方法的建立

目的建立检测sPTA1的方法 ,探讨正常人和肿瘤患者血清中是否存在可溶性PTA1(sPTA1)分子。方法以亲和层析法从血小板纯化的天然PTA1分子作为免疫原 ,制备抗PTA1分子的多克隆抗体(PcAb) ,并以此建立检测sP TA1的双抗体夹心ELISA法。结果建立的双抗体夹心ELISA法敏感性达100ng/L,应用此方法从经TPA ,PHA及抗CD3mAb活化的人PBMC细胞培养上清中检测到sPTA1。与膜型PTA1(mPTA1)分子表达的动态相关研究发现,sPTA1的产生晚于mPTA1分子的表达 ,且可持续存在。检测60例正常人血清sPTA1的水平为(36.2±4.5)μg/L ,16例肿瘤患者为(57.3±5.0)μg/L。血清中sPTA1相对分子质量(Mr)约为50000。结论首次发现sPTA1分子 ,建立了具有较高敏感性和特异性的检测sPTA1的方法 ,为进一步深入研究PTA1分子的生物学功能提供了新的手段。