巴戟天水提取物对间充质干细胞成骨分化中OPG/RANKL表达的影响

目的在成骨诱导条件下,探讨巴戟天水提取物对骨髓间充质干细胞(MSCs)中骨保护素(OPG)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)表达的影响。方法取原代大鼠MSCs,行碱性磷酸酶(ALP)和茜素红染色,确定其成骨分化能力;使用0(对照组)、10 g/L(M1组)及100 g/L(M2组)浓度的巴戟天水提取物处理MSCs细胞,在成骨诱导的条件下干预7 d,收集细胞培养液,并提取细胞的总RNA及总蛋白,采用ELISA法检测培养液中OPG/RANKL的分泌水平,采用Real-time PCR及Western Blot检测MSCs的OPG/RANKL基因和蛋白表达水平。结果经ALP和茜素红染色可见MSCs着色明显。M1处理组和M2处理组OPG/RANKL基因表达水平较对照组上升,分别为(29.0±6.3)%和(60.0±5.4)%;同时M1及M2组细胞培养液中OPG/RANKL的蛋白分泌水平分别较对照组上升(17.0±4.1)%和(39.0±6.4)%;通过Western Blot检测,M1组及M2组OPG/RANKL的蛋白表达较对照组上升(20.0±4.3)%和(35.0±4.3)%。以上结果经统计学分析,其差异均有统计学意义(P<0.05)。结论巴戟天水提取物可以提升MSCs细胞分泌的OPG/RANKL水平,改善骨质疏松患者OPG/RANKL比例失衡状况,这是巴戟天抗骨质疏松的主要机制。