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- [1] SATI抗虫基因在烟草中的转化和表达.[D].刘晓东.新疆农业大学.2001, 01
ARF基因导入烟草的遗传转化研究
被引：5
作者：
徐刚标
[1
]
卢孟柱
[2
]
陆燕
[1
]
机构：
[1] 中南林业科技大学
[2] 中国林业科学研究院林业研究所
来源：
关键词：
生物技术;
ARF基因;
烟草;
根癌农杆菌;
遗传转化;
D O I：
10.14067/j.cnki.1673-923x.2007.05.001
中图分类号：
Q943.2 [植物基因工程];
学科分类号：
摘要：
以烟草无菌苗叶片为外植体,利用叶盘法,将含生长素应答基因(auxin response factor,ARF)的根癌农杆菌LBA4404携带双元质粒载体(pBin438)介导进行遗传转化.结果表明:诱导烟草叶片不定芽的最佳分化培养基为MS+0.8 mg.L-16-BA+0.05mg.L-1NAA,生根培养基为1/2MS+0.02 mg.L-1IBA+0.02 mg.L-1NAA,分化率、生根率分别为96.9%、96.7%;将预培养3 d的外植体与农杆菌菌液浸染3～5 min后,共培养2～3 d,然后转化到含Km75 mg.L-1的选择培养基上进行分化筛选,再转入Km为75 mg.L-1、100 mg.L-1的培养基上进行生根筛选,生根率为66.1%;与对照相比,转基因烟草在形态上发生了明显的改变,叶片颜色变深绿,叶片增厚,主叶脉变粗壮等.PCR扩增,获得40株阳性转基因苗,证明ARF基因已导入烟草中.
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