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登革2型43株病毒包膜蛋白E基因的聚合酶链反应扩增
被引：4
作者：
于曼，秦鄂德，韩照中，徐品芳，司炳银，杨佩英
机构：
[1] 北京军事医学科学院微生物流行病研究所
来源：
关键词：
登革热病毒，基因．病毒，聚合酶链反应／方法，病毒蛋白质，RNA．病毒;
D O I：
暂无
中图分类号：
R394.8 [医学遗传工程];
学科分类号：
0831 ;
摘要：
以我国登革２型４３株病毒ＲＮＡ为模板，采用逆转录－聚合酶链反应技术（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增Ｅ基因片段。拟扩增的Ｅ基因片段始于登革病毒编码序列５＇端的１０３６ｂｐ，止于３＇端的２３０４ｂｐ，其间含有１个ＨｉｎｄⅢ酶切位点，３＇端有１个ＳｍａⅠ位点，５＇端有１个ＥｃｏＲⅠ位点。建立了扩增大片段的实验条件并制备出了大于１２００ｂｐ以上的片段。该片段与标准分子量对比为１２９２ｂｐ左右，经ＨｉｎｄⅢ酶切，出现７８１ｂｐ和５１１ｂｐ２个片段，用Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和光敏生物素标记核酸探针证实制备出的１２９２ｂｐ片段为Ｅ基因片段，此片段可直接用于克隆表达。
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