印楝素A对粉纹夜蛾Hi-5细胞的毒性机理

被引:16
作者
李文欧
徐汉虹
张志祥
廖绍裕
机构
[1] 华南农业大学天然农药与化学生物学教育部重点实验室/昆虫毒理研究室
关键词
印楝素A; 粉纹夜蛾细胞系; 细胞毒性; 细胞形态; 蛋白质含量; 谷胱甘肽含量;
D O I
10.16380/j.kcxb.2008.08.010
中图分类号
S482.3 [杀虫剂];
学科分类号
090403 [农药学];
摘要
利用粉纹夜蛾Trichoplusia ni Hbner卵细胞系(Hi-5细胞系)在细胞水平研究了印楝素(azadirachtin)A杀卵活性的毒性机理。以MTT法研究了印楝素A对粉纹夜蛾Hi-5细胞的生长抑制率,结果表明最初两天印楝素A对Hi-5细胞无较明显活性,但随后几天抑制率显著增加。用Giemsa染色法对细胞进行染色,观察细胞形态发生的变化,发现:1.25μg/mL印楝素A处理Hi-5细胞1d后,细胞已无法贴壁,形状变圆,接着细胞形态变得极不规则,有凋亡小体出现。用Ho33342染料对Hi-5细胞核DNA染色,通过荧光显微镜观察发现:经印楝素A处理后第1天,部分细胞核染色体发生异常凝聚,此后异常细胞核比例增多,核膜严重破损。以异硫氰酸荧光素(FITC)荧光染料研究了Hi-5细胞的蛋白质含量变化,发现1.25μg/mL印楝素A处理Hi-5细胞1d后,细胞蛋白质指数(DI)为1.070±0.018,至第3dDI值上升到1.912±0.019。分析了印楝素A处理后Hi-5的还原性谷胱甘肽(GSH)的相对含量变化,发现1.25μg/mL处理浓度下,各天处理组GSH抑制率有显著差异。结果显示印楝素A能够抑制Hi-5细胞增殖,影响细胞骨架正常功能,降低细胞活力。
引用
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