戊型肝炎病毒结构区OFR2基因在毕赤酵母中的分泌型表达

被引:2
作者
张春江
沈心亮
雷清
李启民
机构
[1] 兰州大学生命科学学院,兰州生物制品研究所,兰州生物制品研究所,兰州生物制品研究所兰州,兰州,兰州,兰州
关键词
戊型肝炎病毒; 开放读码框架; 巴斯德毕赤酵母; 表达载体; 电转化; 诱导表达;
D O I
10.19526/j.cnki.1005-8915.2002.04.004
中图分类号
Q786 [基因的表达];
学科分类号
071007 [遗传学];
摘要
为寻求新型表达系统来研制戊型肝炎基因工程疫苗,利用甲醇营养型酵母Pichia pastoris表达系统表达戊型肝炎病毒(HEV)结构区ORF2 1.3 kb基因。对构建的酵母分泌型表达载体pHIL-S1/HEV和pPIC9/HEV重组体,酶切线性化后转化入GS115酵母菌,经表型鉴定,PCR扩增筛选阳性克隆,对不同表型,不同表达载体的重组株用含甲醇的培养基诱导表达,ELISA及SDS-PAGE筛选表达活性菌株,Western-blot证实表达蛋白与HEVORF2单克隆抗体有特异性反应。得到有效表达HEVORF2蛋白的菌株并初步优化表达条件。
引用
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共 1 条
[1]
我国戊型肝炎研究进展 [J].
庄辉 ;
朱万孚 ;
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中华微生物学和免疫学杂志, 1999, (05)