两种分泌抗PrP单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其初步鉴定

被引:3
作者
赵丽
计融
王健伟
韩春卉
于修平
董小平
洪涛
机构
[1] 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所洪涛院士实验室,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所营养与食品安全所生物污染监控室,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所洪涛院士实验室,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所营养与食品安全所生物污染监控室,山东大学医学院微生物教研室,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所洪涛院士实验室,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所洪涛院士实验室北京病毒病所与山东大学联合培养博士研究生,山东大学医学院微生物教研室,北京,北京,北京,北京,北京
关键词
朊病毒; 抗体,单克隆; 免疫印迹法; 酶联免疫吸附测定;
D O I
暂无
中图分类号
R392 [医学免疫学];
学科分类号
100102 ;
摘要
目的 制备具有广谱种属反应性的PrP单克隆抗体 (McAb) ,用于可传播性海绵样脑病(TSE)的诊断及致病机制研究。方法 分别将对应于牛PrP2 9~ 4 8(BoP1 )、PrP89~ 10 8(BoP2 )的两种多肽与匙孔血蓝蛋白 (KLH)偶联 ,免疫BALB c小鼠 ,经细胞融合后获得分泌针对上述两种多肽的杂交瘤细胞株 ,用Western blot方法检测这些细胞株分泌的McAb与牛 (Bo)、人 (Hu)和仓鼠 (Ha)PrP蛋白的反应性。结果 通过细胞融合和 2~ 3轮克隆化 ,用ELISA筛选出分泌抗BoP1 和BoP2 抗体的杂交瘤细胞株D1 1 和D8。Westernblot显示 ,获得的McAb均能分别与重组BoPrP(2 5~ 2 4 2 )、重组HuPrP(2 3~ 2 31)和HaPrP(2 3~ 2 31)反应。结论 获得了可与牛、人和仓鼠PrP反应的两种McAb ,可用于哺乳类PrP检测及TSE致病机制研究。
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