pcDNA3-hBMP2转染对成纤维细胞生物学性状的影响

被引：22

作者：

栗向东

胡蕴玉

机构：

[1] 西安第四军医大学西京医院全军骨科研究所,西安第四军医大学西京医院全军骨科研究所

来源：

中华外科杂志 | 2001年 / 04期

关键词：

骨形态发生蛋白质类; 转染; 基因表达; 成纤维细胞;

D O I：

暂无

中图分类号：

R68 [骨科学（运动系疾病、矫形外科学）];

学科分类号：

100220 [骨科学];

摘要：

目的　探讨人BMP2 基因转染对成纤维细胞NIH3T3生物学性状的影响。　方法　构建重组真核表达载体pcDNA3 hBMP2 ,并在脂质体介导下 ,将其导入NIH3T3成纤维细胞。通过G418筛选获得阳性克隆 ,用细胞原位杂交和免疫组织化学方法检测hBMP2 基因在NIH3T3成纤维细胞内的表达情况 ;MTT法和FCM检测pcDNA3 hBMP2 转染成纤维细胞后对细胞增殖和细胞周期的影响 ,透射电镜观察转染pcDNA3 hBMP2 后成纤维细胞超微结构的改变 ,碱性磷酸酶的检测观察转染pcDNA3 hBMP2 后成纤维细胞向成骨细胞分化情况。　结果　转染pcDNA3 hBMP2 后的NIH3T3细胞内有大量hBMP2 mRNA的转录及其蛋白的表达 ;转染pcDNA3 hBMP2 对成纤维细胞增殖和细胞周期无影响 ;转染pcDNA3 hBMP2 后的成纤维细胞超微结构可见粗面内质网丰富 ,囊腔扩张明显 ,其内充满中等电子密度的蛋白分泌物 ;碱性磷酸酶活性显著上升。　结论　pcDNA3 hBMP2 转染对成纤维细胞NIH3T3增殖和细胞周期无影响 ,转染后的成纤维细胞不仅可形成BMP2 ,而且具有向成骨细胞系分化的特性

引用

页数：6

共 2 条

[1]

Bone morphogenetic protein 2 (BMP-2) enhances BMP-3, BMP-4, and bone cell differentiation marker gene expression during the induction of mineralized bone matrix formation in cultures of fetal rat calvarial osteoblasts [J].