枯草芽孢杆菌sacB基因的功能验证及应用

被引：6

作者：

吴菁 ^{[1
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刘秀敏 ^{[1
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]}

张维 ^{[1
]}

陈明 ^{[1
]}

林敏 ^{[1
]}

机构：

[1] 中国农业科学院生物技术研究所

[2] 河北交通职业技术学院

来源：

核农学报 | 2008年 / 05期

关键词：

枯草芽孢杆菌; sacB基因; 蔗糖果聚糖酶; 突变率;

D O I：

暂无

中图分类号：

S182 [农业微生物学];

学科分类号：

09 ;

摘要：

本研究将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)基因组DNA中克隆的1.4 kbsacB基因片段连接到表达载体pET-28a(+),构建了sacB基因表达载体pSacB。通过测定蔗糖水解产生的葡萄糖具有的还原性,确定sacB基因产物具有蔗糖果聚糖酶活性。该基因表达后,导致大肠杆菌(Escherichia coli)细胞不能在含5%蔗糖的培养基中生存。同时发现sacB基因也能赋予耐辐射菌株Deinococcussp.BR501蔗糖敏感性。利用条件致死sacB基因的这一特性,我们分析了D.sp.BR501的突变率,结果表明DNA错配修复缺失突变株(ΔmutS1)的突变频率明显高于野生型。因此枯草芽孢杆菌sacB基因可作为验证DNA损伤修复能力的一种筛选标记。

引用

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页码：590 / 594

页数：5

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张淑梅 ;

王玉霞 .

生物技术, 2004, (05) :77-78

[3] A simple method for multiple modification of the Escherichia coli K-12 chromosome [J].

Mizoguchi, Hiroshi ;

Tanaka-Masuda, Kimie ;

Mori, Hideo .

BIOSCIENCE BIOTECHNOLOGY AND BIOCHEMISTRY, 2007, 71 (12) :2905-2911

[4] Combined sacB-based negative selection and cre-lox antibiotic marker recycling for efficient gene deletion in Pseudomonas aeruginosa [J].

Quénée, L ;

Lamotte, D ;

Polack, B .

BIOTECHNIQUES, 2005, 38 (01) :63-67

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Mennecier, S ;

Coste, G ;

Servant, P ;

Bailone, A ;

Sommer, S .

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[6] Eukaryotic DNA mismatch repair [J].

Kolodner, RD ;

Marsischky, GT .

CURRENT OPINION IN GENETICS & DEVELOPMENT, 1999, 9 (01) :89-96

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Yamamoto, Y ;

Takahashi, Y ;

Kawano, M ;

Iizuka, M ;

Matsumoto, T ;

Saeki, S ;

Yamaguchi, H .

JOURNAL OF NUTRITIONAL BIOCHEMISTRY, 1999, 10 (01) :13-18

[8]

Mismatch Repair in Replication Fidelity, Genetic Recombination, and Cancer Biology[J] . P Modrich,R Lahue.Annual Review of Biochemistry . 1996

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SUMI, H ;

HAMADA, H ;

TSUSHIMA, H ;

MIHARA, H ;

MURAKI, H .

EXPERIENTIA, 1987, 43 (10) :1110-1111

[10] CHROMOSOMAL LOCATION OF MUTATIONS AFFECTING SUCROSE METABOLISM IN BACILLUS-SUBTILIS MARBURG [J].

LEPESANT, JA ;

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DEDONDER, R ;

KUNST, F .

MOLECULAR AND GENERAL GENETICS, 1972, 118 (02) :135-+