实时定量聚合酶链反应检测心血管活性多肽apelin方法的建立

被引：3

作者：

钟久昌

黄东阳

杨艳梅

蒋纪恺

李一凡

胡盛平

机构：

[1] 汕头大学医学院分子生物学中心

[2] 汕头大学医学院分子生物学中心广东汕头

[3] 广东汕头

来源：

汕头大学医学院学报 | 2004年 / 03期

关键词：

实时定量聚合酶链反应; 心血管活性多肽; Apelin;

D O I：

暂无

中图分类号：

R446.9 [其他];

学科分类号：

100208 [临床检验诊断学];

摘要：

目的 :建立实时定量聚合酶链反应 (RQ PCR)检测心血管活性多肽的方法 ,为快速、准确地分析心脏组织中apelin基因表达奠定基础。方法 :根据心血管活性多肽apelin基因序列 ,设计并合成引物和荧光标记TaqMan探针。将逆转录聚合酶链式反应扩增的apelin基因片段克隆至pGEM Teasy载体 ,重组质粒经蓝白筛选、酶切、测序鉴定后 ,作为阳性克隆标准品 ,用于标准曲线的制定 ,由此可定量检测出每一样品模板的起始拷贝数。结果 :阳性克隆标准品制作的标准曲线可显示循环阈值与模板浓度具有良好的线性关系 (r =0 970 ) ,可用于apelin基因表达的起始拷贝数定量测定。结论 :RQ PCR方法较常规PCR技术更为简便、准确、特异、灵敏 ,对定量检测及研究心血管活性多肽有积极意义

引用

页码：154 / 156+162 +162

页数：4