应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱和N端测序鉴定重组人粒/巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的结构

被引：5

作者：

王红霞

杨松成

张学敏

蔡耘

桑志红

王杰

机构：

[1] 军事医学科学院国家生物医学分析中心!北京

[2] 军事医学科学院国家生物医

来源：

药物分析杂志 | 2001年 / 05期

关键词：

重组人粒/巨噬细胞集落刺激因子; 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱; N端测序; 肽质量指纹谱;

D O I：

10.16155/j.0254-1793.2001.05.003

中图分类号：

O657.63 [质谱分析];

学科分类号：

摘要：

目的 :应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 (MALDI -TOF -MS)和N端测序方法鉴定重组人粒 /巨噬细胞集落刺激因子 (rhGM -CSF)的结构。方法 :1 用Edman降解法进行N端测序。 2 应用MALDI-TOF -MS测定分子量并鉴定纯度。 3 通过还原、烷基化确定rhGM -CSF分子中二硫键数目。 4 通过蛋白内切酶Glu -C酶切的肽质量指纹谱确证氨基酸序列并确证其中两对二硫键的配对。结果 :1 测定的rhGM -CSFN端 15个氨基酸序列与从cDNA推导的序列一致。 2 测定的rhGM -CSF分子量与理论计算值一致。 3 证明rhGM -CSF没有自由巯基 ,含有两对二硫键 ,与理论值一致。 4 证明rhGM -CSF的氨基酸序列是正确的 ,并确证其中的两对二硫键配对正确。结论 :确证重组人粒 /巨噬细胞集落刺激因子 (rhGM -CSF)的结构是正确的 ,没有修饰、变异和氨基酸的丢失。应用的方法灵敏、准确、可靠

引用

页码：312 / 316

页数：5