禽流感病毒A/Goose/Guangdong/3/96(H5N1)NA基因的克隆及其重组禽痘病毒转移载体的构建

被引:10
作者
乔传玲
于康震
邓国华
王秀荣
孟庆文
田国斌
唐秀英
机构
[1] 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室
[2] 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物流感研究中心
[3] 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物流感研究中心 黑龙江哈尔滨
[4] 黑龙江哈尔滨
关键词
禽流感病毒; 神经氨酸酶基因; 重组禽痘病毒;
D O I
10.16303/j.cnki.1005-4545.2003.02.003
中图分类号
S852.65 [家畜病毒学];
学科分类号
090601 ;
摘要
采用 RT- PCR技术扩增了禽流感病毒 A/ Guangdong/ 3/ 96 (H5 N1) [GD3/ 96 ]神经氨酸酶 (NA)基因 ,并将其克隆到 p UC18质粒中进行测序。核苷酸序列测定结果为 :NA基因全长为 14 10 bp,共编码 4 6 9个氨基酸。从 p UCNA中切下 NA基因片段 ,将其亚克隆到质粒 p SY5 38的 Eco R 位点 ,将带有痘苗病毒启动子 P11的 L ac Z基因平端克隆到该质粒的 Sm a 位点 ,然后切下同时含有 NA及 L ac Z基因的片段 ,再亚克隆到禽痘病毒载体 p SY6 81的 Not 位点 ,经限制性内切酶分析、PCR鉴定等 ,证明含有禽流感病毒 NA基因的重组禽痘病毒转移载体已构建成功 ,从而为进一步筛选表达 NA蛋白的重组禽痘病毒及探讨该蛋白的免疫原性奠定了实验基础。
引用
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共 2 条
[1]  
Infectious bursal disease virus structural protein VP 2 expressed by a fowlpox virus recombinant confers protection against disease in chickens[J] . H.-G. Heine,D. B. Boyle.Archives of Virology . 1993 (3)
[2]  
Vaccinia virus expression and sequence of an avian influenza nucleoprotein gene: potential use in diagnosis[J] . V. R. Harley,P. J. Hudson,B. E. H. Coupar,P. W. Selleck,H. Westbury,D. B. Boyle.Archives of Virology . 1990 (1)