成年SD鼠骨髓基质干细胞向神经元样细胞分化过程中分化与凋亡关系的研究

目的 :探讨体外诱导骨髓基质干细胞向神经元样细胞分化过程中分化和凋亡间的关系 ,为进一步延长神经元样细胞的存活提供理论和实验依据。方法 :采用全骨髓法分离培养成年SD鼠骨髓基质干细胞至第 5代 ,以 β-巯基乙醇 (1mmol/L)及维甲酸 (RA ,1 0 - 6 mol/L)诱导分化 ,于诱导后 1h、3h、5h分别行神经元特异性抗原MAP- 2免疫组化鉴定 ,并计数神经元样细胞数 ,计算分化率。核荧光染料DAPI检测诱导后 5h和 2 4h细胞核的凋亡特异性形态学改变 ,流式细胞仪对细胞凋亡峰的分析检测诱导后 1h、3h、5h细胞凋亡率。结果 :成年鼠骨髓基质干细胞经 β -巯基乙醇 (1mmol/L)及维甲酸 (RA ,1 0 - 6 mol/L)诱导 30min后可见神经元样细胞出现 ,经MAP - 2免疫组化鉴定 ,此类细胞呈阳性 ,诱导后 1h、3h、5h神经元样细胞分化率分别为 41 %、44 %、73 %和 2 4 %、37%、61 %。但诱导后 5h见细胞漂浮并死亡 ,此时DAPI染色显示部分细胞核浓缩 ,出现核碎片。流式细胞仪检测经 β -巯基乙醇诱导后 1h、3h、5h细胞的凋亡率分别为 1 .5 %、6 .1 %、2 1 .5 % ,经RA诱导后的凋亡率分别为 1 .5 %、1 .7%、1 2 .3 %。结论 :①β -巯基乙醇及RA诱导骨髓基质干细胞分化成为神经元样细胞的能力不同。②骨髓基质干细胞在向神经元样细胞分化的