种特异性PCR快速检测奶粉中阪崎肠杆菌研究

被引:7
作者
叶应旺 [1 ]
吴清平 [2 ]
郭伟鹏 [2 ]
张菊梅 [2 ]
董晓晖 [1 ]
机构
[1] 中国科学院南海海洋研究所
[2] 广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室
基金
广东省自然科学基金;
关键词
阪崎肠杆菌; α-1; 4-葡萄糖苷酶基因; ompA基因; 奶粉;
D O I
10.13344/j.microbiol.china.2007.06.025
中图分类号
TS252 [乳品加工工业];
学科分类号
083203 ;
摘要
阪崎肠杆菌是一种目前认为以奶粉为传播媒介的食源性条件致病菌,通过α-1,4-葡萄糖苷酶基因和ompA基因分别设计引物ESF-ESR和ESSF-ESSR,进行单重和双重PCR方法研究,结果显示所有阪崎肠杆菌菌株PCR扩增均为阳性,阴性对照均未扩增出目的片段;纯菌单重PCR灵敏度分别为102cfu/mL和101cfu/mL,双重PCR灵敏度为103cfu/mL;在有或无其他细菌存在时,人工污染阪崎肠杆菌模拟样品单重PCR检测灵敏度分别为103cfu/mL和102cfu/mL,双重PCR检测灵敏度为104cfu/mL;实际样品检测显示PCR方法与传统方法具有很好的一致性。结果表明:该PCR方法具有很好的种特异性和灵敏度,能够克服奶粉中杂菌对快速检测阪崎肠杆菌造成的干扰,减少以保守序列来设计引物导致假阳性结果的出现,可以较好地应用于奶粉中阪崎肠杆菌的检测与鉴定。
引用
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共 1 条
  • [1] Treatment of winery effluent with upflow anaerobic sludge blanket (UASB) – granular sludges enriched with Enterobacter sakazakii[J] . M. Keyser,R.C. Witthuhn,L.-C. Ronquest,T.J. Britz.Biotechnology Letters . 2003 (22)