用甲醇酵母表达经基因优化的HPV 6型L1蛋白

被引：3

作者：

李平川

张晓光

周玲

曾毅

机构：

[1] 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所肿瘤病毒室,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所肿瘤病毒室,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所肿瘤病毒室,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所肿瘤病毒室北京,北京,北京,北京

来源：

中华实验和临床病毒学杂志 | 2003年 / 04期

关键词：

乳头状瘤病毒,人; 蛋白,L1; 毕赤酵母; 基因,结构;

D O I：

暂无

中图分类号：

R346 [];

学科分类号：

摘要：

目的利用甲醇酵母系统Pichia pastoris高效表达HPV 6型L1蛋白。方法按照Pichiapastoris偏爱密码子合成L1全长基因,构建pPIC3.5K-HPV6-L1表达载体,转化KM71,经组氨酸缺陷的MD培养基和G418筛选,PCR确认L1基因整合,使用BMGY/BMMY培养/诱导目的基因的表达。结果筛选到3株阳性表达克隆,Western blot显示表达产物有部分糖基化现象,使用能识别完整VLP的单抗进行间接免疫荧光检测提示L1蛋白在Pichia细胞内以空间构象形式存在。通过离子交换和亲和层析两步纯化从1L发酵液中得到125μg纯的L1蛋白。结论通过基因优化在甲醇酵母中表达HPV6-L1蛋白,这将为结构与功能研究以及疫苗开发提供条件。

引用

页码：12 / 16

页数：5

共 6 条

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